26. 毁损伏隔核对吗啡给药大鼠地点偏爱与脑功能影响的实验研究
27. 盐酸氟西汀对慢性应激抑郁模型小鼠神经肽 Y 表达的研究
28. MAOA、TPH基因多态性与精神分裂症的关联研究
29. 脑侧化在精神分裂症幻听发生机制中的作用 - 功能核磁共振研究
30. 侧脑室注射 Ucn3 对大鼠焦虑样行为的调节以及对 5- 羟色胺表达的影响
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毁损伏隔核对吗啡给药大鼠地点偏爱与脑功能影响的实验研究
邵云
中国医科大学附属第二医院心理卫生门诊
目的：
目前阿片类药物所致的身体依赖和精神依赖的内在机制仍不甚清楚，特别是对复吸起决定性作用的精神依赖机理的研究，还基本处于初始阶段。大量研究资料表明，脑中的奖赏中枢（中脑边缘多巴胺系统）参与药物精神依赖的形成，主要包括多巴胺（DA）神经元集中的中脑腹侧背盖区（VTA）及其主要投射区伏隔核（NAc）和额叶皮质（PFC）等边缘前脑区域。阿片类药物同其它依赖性药物一样直接或间接作用于中脑边缘DA系统，最终使 NAc 中 DA 水平发生改变来介导奖赏效应。 NAc 是产生奖赏效应的关键核团，而奖赏效应是产生精神依赖的必要条件。另外，今年来发展成熟起来的定向毁损技术也为寻找参与药物依赖的脑核团和治疗药物成瘾提供了新的方法。目前，药物成瘾行为已能用愈加精确的动物模型来模仿，人的药物成瘾的许多特征已能在实验动物上复制。基于上述理论，本实验采用化学毁损大鼠 NAc ，分别进行条件性位置偏爱（CPP）和 Morris 水迷宫两种行为学实验，全面评价对吗啡给药大鼠地点偏爱与大鼠脑功能的影响，为临床治疗药物依赖提供依据。
方法：
选择雄性 wistar 雄性大鼠为实验对象，在脑立体仪的引导下，用微量加样器将 6 －羟多巴胺（ 6 － OHDA ）缓慢注射入所有毁损组大鼠双侧伏隔核，而未毁损组注射等量生理盐水。然后分别进行条件位置偏爱实验和 Morris 水迷宫实验。实验大鼠分为单纯给药组、毁损给药组、单纯毁损组与对照组四组。吗啡两组大鼠连续 6 天每只上下午各腹腔注射一次，分别注射等体积盐酸吗啡和生理盐水；另两组则连续 6 天上下午均注射等体积生理盐水，分别放入白黑两盒。吗啡和生理盐水剂量 6 天逐渐递增。抬高两盒中间隔板进行测试，大鼠不注射任何物质，两盒中自由活动，记录 15min 内大鼠分别在黑、白盒内停留时间，对比四组间差异。 Morris 水迷宫实验包括 ① 定点航行实验； ② 空间探索实验。实验Ⅰ分为 NAc 毁损组与对照组，分别进行定点航行实验和空间探索实验，最后对比两组间差异。实验Ⅱ为自身对照实验，该组大鼠在毁损 NAc 前后分别进行 Morris 水迷宫定点航行实验和空间探索实验，最后对比毁损前后的差异。全部实验结束后，实验大鼠取脑，作脑组织学切片染色观察毁损情况。
结果：
⒈ 脑切片染色结果显示， 6－OHDA 能够毁损伏隔核中的多巴胺能神经系统。 ⒉ 在条件位置偏爱实验中，单纯给药组与毁损给药组、单纯毁损组、对照组三组相比条件性位置偏爱存在显著性差异（ P ＜ 0.05 ），而其它三组之间无显著性差异；在自然戒断状态下，单纯给药组条件性位置偏爱经历了先增加后减少的过程，其它三组为逐渐减少。 ⒊ 在水迷宫实验中，无论是毁损组与对照组相比，还是毁损前后自身对照定点航行实验与空间探索实验均无明显差异（ P ＞ 0.05 ）。
结论：
⒈ 化学毁损伏隔核中的多巴胺系统能够影响吗啡给药大鼠 CPP 的形成，进而说明影响精神依赖的形成。 ⒉ 化学毁损伏隔核中的多巴胺系统对大鼠的空间记忆形成，再获得及空间定位能力无明显影响。
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盐酸氟西汀对慢性应激抑郁模型小鼠神经肽Y表达的研究
沈悦娣 1 陈炜 2
1. 杭州师范学院临床医学院 2. 浙江大学医学院附属邵逸夫医院精神科
目的：
探讨盐酸氟西汀对慢性应激抑郁模型小鼠脑内 NPY 表达的影响。
材料与方法：
健康昆明系小鼠 48 只，雌、雄各半 , 采用慢性轻度不可预见应激 (chronic unpredictable mild stress , CUMS) 抑郁模型与孤养抑郁模型相结合的方法制作抑郁模型 , 利用旷场试验 ( Open-Field ) 法 , 观察模型组与正常对照组行为学（活动次数、总路程、速度）、体重改变方面的差异，以证实模型制作的成功与否。将慢性应激抑郁小鼠模型，随机分成盐酸氟西汀组、阿米替林组、模型对照组，每组各 12 只，设正常对照组，利用半定量逆转录－聚合酶联反应(RT －PCR) 法、细胞酶联免疫法及蛋白免疫印迹 ( Western － blot ) 法、免疫组织化学检测技术，比较四组小鼠下丘脑 NPY 的表达。统计学方法：计量资料以均数±标准差（ ± s）表示 , 组间比较采用单因素方差分析（one-way ANOVA ）。以 P<0.05 为显著性差异， P<0.01 为非常显著 性差异。所有数据均使用 SPSS 10.0 统计软件包进行统计。
结果：
1. 第1天时，模型组与正常组比较，总路程、活动次数、速度、体重均无明显统计学差异。第 7 天时，与正常组比较，模型组总路程明显下降，差异有统计学意义。 21 天时，模型组在活动次数、总路程、体重增加上，与正常组明显下降，差异有统计学意义。
2. 半定量 RT-PCR 法：与正常组比较，抑郁模型组下丘脑 NPY 的 mRNA 表达下降；经盐酸氟西汀、阿米替林治疗后，下丘脑 NPY 的 mRNA 及蛋白表达增高。阿米替林组比盐酸氟西汀组更明显，但差异无统计学意义（ p> 0.05 ）。
3. Western-blot 法：与正常组比较，抑郁模型组下丘脑 NPY 的蛋白条带密度表达显著下降，而 β-actin 蛋白质条带在四组小鼠中表达均一；经盐酸氟西汀、阿米替林治疗后，下丘脑 NPY 的蛋白表达增高，而阿米替林组和盐酸氟西汀组基本相同。
4. 免疫组织化学法：正常组细胞形态表现为树突状和星状突起，胞膜和胞质的着色与背景色相同。模型组胞膜和胞质呈棕黄色染色；经氟西汀、阿米替林治疗后，胞膜和胞质的着色与背景色接近。
结论：
1. 抑郁模型小鼠下丘脑 NPY 的 mRNA 及蛋白表达下降。
2. 抑郁模型小鼠免疫组化阳性细胞显著增加，盐酸氟西汀、阿米替林治疗后下丘脑 NPY 阳性细胞基本消失。
3. 盐酸氟西汀提高抑郁模型小鼠脑内 NPY 的 mRNA 及蛋白表达，减少阳性细胞，可能是其抗抑郁效应的机理之一。
【关键词】 抑郁症 慢性应激模型 神经肽 Y 盐酸氟西汀
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MAOA、TPH基因多态性与精神分裂症的关联研究
石玉中 王从辉 吕路线
河南省精神病医院
目的：
（ 1 ）探讨单胺氧化酶 A （ MAOA ）、色氨酸羟化酶（ TPH ）基因多态性与精神分裂症的关系；（ 2 ）探讨上述基因多态性与精神分裂症患者性别、家族史、临床亚型、冲动攻击行为、故意自伤、自杀行为（自杀未遂）及 PANSS 量表各因子的关系。
方法：
（ 1 ）参照 CCMD- Ⅲ 诊断标准，选取 212 例精神分裂症患者，所有病例来自新乡医学院第二附属医院，应用阳性与阴性症状量表 (PANSS) 及外显攻击量表（ OAS ）来评定患者的临床症状。（ 2 ）应用聚合酶链式反应 (PCR) 扩增及限制性片段长度多态性 (RFLP) 技术检测 212 例患者与 168 例对照的 MAOA 、 TPH 基因型，采用病例－对照的关联分析方法对精神分裂症患者及正常对照的基因型和等位基因频率并进行分析。
结果：
（ 1 ） MAOA 、 TPH 基因的基因型频数和等位基因频率在患者组与对照组间的分布无显著性差异；但分性别比较，在男性患者中， C/T 基因型分布频率显著高于男性对照组；在女性患者中，等位基因 A 分布频率显著高于女性对照组。（ 2 ） MAOA 、 TPH 基因的基因型频数和等位基因频率在家族史阴、阳性间、利培酮有效组与无效组间、有攻击行为患者组与无攻击行为患者组及临床亚型间的分布均无显著性差异。（ 3 ） MAOA 基因型频数和等位基因频率在有自杀行为患者组与无自杀行为患者组间的分布均无显著差异；有自杀行为患者组 TPH 基因的 A/A 基因型和等位基因 A 频率分布显著高于无自杀行为患者。（ 4 ） MAOA 基因的不同基因型与 PANSS 量表中的阳性症状及思维障碍间有显著性差异； TPH 基因的不同基因型与 PANSS 量表中的各症状因子间均无显著性差异。
结论：
（ 1 ） MAOA 、 TPH 基因多态性与精神分裂症无关联。但按性别分析， MAOA 基因与男性精神分裂症的发病有关，基因型 C/T 可能是男性精神分裂症发病的易感因素； TPH 基因与女性精神分裂症的发病有关， TPH 218A 等位基因是女性精神分裂症患病的危险因子。（ 2 ） MAOA 、 TPH 基因多态性与精神分裂症患者的家族史及临床亚型无关联。（ 3 ） MAOA 、 TPH 基因多态性在利培酮治疗首发精神分裂症的疗效中可能不起作用。（ 4 ） MAOA 、 TPH 基因多态性与精神分裂症患者的冲动攻击行为无关。（ 5 ） MAOA 基因多态性与精神分裂症患者的自伤、自杀（自杀未遂）行为无关， TPH 基因多态性与精神分裂症患者的自伤、自杀未遂显著关联，基因型 A/A 与精神分裂症患者的自杀未遂有关，等位基因 A 是精神分裂症患者自杀未遂危险因子。（ 6 ） MAOA 基因的基因型 T/T 与精神分裂症的阳性症状及思维障碍有关联， TPH 基因多态性与精神分裂症的症状无关。
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脑侧化在精神分裂症幻听发生机制中的作用 - 功能核磁共振研究
史家波 1 张志珺 2 郝贵峰 1,2 姚志剑 1 陈宁 1 朱朝喆 3
1 南京医科大学第二临床医学院 2 东南大学附属中大医院 通讯作者
3 北京师范大学神经认知科学与学习国家重点实验室
目的：
利用事件相关功能核磁共振（ fMRI ）结合神经认知功能评估在体对比研究精神分裂症患者幻听组、非幻听组和正常对照组左右侧化声音激活脑区的差异，以探讨脑侧化异常产生幻听的病因假说。
对象和方法：
中国汉族成年男性精神分裂症偏执型患者（符合 CCMD-3 ） 26 名 [ 幻听组患者 13 名，阳性症状量表（ SAPS ）幻听分值大于 4 ；非幻听患者 13 名 ] 和年龄、教育程度相匹配的正常志愿者 13 名，均为强右利手；由受试者本人或家属签署知情同意书。受试者均接受听觉注意（ auditory attention test, AAT ）、韵律（ rhythm scale, RS ）和语言流畅性（ verbal fluency test ， VFT ）测验及 MRI 扫描。 efMRI 成像以辨别声音源于左侧或右侧为辨别任务，以 BOLD 效应为原理采集 EPI 功能图像。通过反馈系统实时记录行为学反应结果。最后共有 12 例幻听组患者和 9 例非幻听组患者疗后 10 周再次行 fMRI 扫描并最终进入统计分析。分别运用 SPSS11.5 和 SPM2 软件分析神经心理学测试结果及功能成像数据。
结果：
（一）神经心理测试结果 :1.SAPS 和 SANS 评定：与非幻听组患者相比 , 幻听组患者除幻觉分和阳性总分显著增高 , 差异有显著性（ P<0.05 ） , 其余 SAPS 各因子分和 SANS 总分因子分均无显著性差异 (P 均 >0.05) 。 2.AAT ：幻听患者组疗前错误数显著高于非幻听患者组和正常对照组，非幻听组错误数显著高于正常组；疗后错误数仍显著高于正常对照组而显著低于非幻听患者组（均 P<0.05 ）； ST ：幻听患者组疗前总分高于正常对照组； VFT ：幻听患者组疗前 / 疗后前 15 秒总数均少于正常组，而疗后 46 － 60 秒总数多于非幻听患者组和正常对照组； AAT 、 RS 和 VFT 各因子分与 SCH 幻听分之间无相关性（ P>0.05 ）；疗后幻听组错误数仍高于正常组但低于非幻听组（ P 均 <0.05 ）。（二）功能核磁共振研究结果：组内比较：幻听组患者治疗前左右侧化声音显著激活脑区比较均无显著性差异；治疗后，与右侧化声音相比，患者在辨别左侧化声音时显著激活了右颞上回、左颞下回、左梭状回、右额中回和左颞中回；而与左侧化声音相比，在辨别右侧化声音时无显著激活脑区（ FDR 校正， P<0.01 ，体素阈值 >10 ）。 非幻听组患者疗前疗后左右侧化声音刺激比较均未发现显著激活脑区（ FDR 校正， P<0.01 ，体素阈值 >10 ）。与右侧化声音相比，正常组受试者在辨别左侧化声音刺激时显著激活了左楔前叶和右旁中央小叶；而与左侧化声音相比，在辨别右侧化声音刺激时未发现显著激活脑区（ FDR 校正， P<0.01 ，体素阈值 >10 ）。组间比较：在辨别左侧化声音刺激时，幻听组与正常组比较无显著激活脑区，而正常组与幻听组相比显著激活右旁中央小叶；在辨别右侧化声音刺激时，幻听组和正常组相互比较均无显著激活脑区（ P<0.001 ，未校正，体素值 >50 ）。与非幻听组相比，正常组受试者在辨别左侧化声音刺激时显著激活两侧颞上回、左楔前叶、扣带回和左缘上回；在辨别右侧化声音刺激时显著激活两侧颞上回、右颞中回和左脑岛；相反，非幻听组与正常组比较无论是在辨别左侧化还是右侧化声音刺激均未发现显著激活的脑区（ p<0.001 ，未校正，体素值 >50 ）。
结论：
神经认知功能评定研究 1. 精神分裂症患者存在颞叶和额叶功能障碍，伴有幻听患者颞叶功能损害程度更严重； 2.APS 治疗前 SCH 患者额叶功能低下不能抑制颞叶的内源性刺激，患者误将内源性刺激感受为外来声音而产生幻听；治疗后，额叶功能部分恢复，对颞叶内源性刺激的抑制功能随之恢复，幻听症状改善，这支持幻听产生的内源性刺激失控假说。功能核磁共振研究： 1. 治疗前 SCH 患者亚组左右脑语言信息加工的功能侧化消失，主要由右脑功能增强所致。脑侧化消失可能与 SCH 发病有关，而左脑功能无相应增强可能是幻听产生机制之一。 2.APS 治疗后，幻听组脑语言信息加工能力恢复左侧化。治疗前后 fMRI 比较研究表明，治疗后幻听组患者左右脑信息处理能力比治疗前增强，而且左脑功能增强更显著，导致脑语言功能左侧化恢复，进一步支持了幻听是由于左脑功能不能相应增强导致幻听的推测。
【关键词】 幻听 精神分裂症 脑侧化 功能核磁共振 血氧水平依赖
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侧脑室注射 Ucn3 对大鼠焦虑样行为的调节以及对 5- 羟色胺表达的影响
宋飞 王旭梅 韩继阳 邵云
中国医科大学附属二院心理科
目的：
近年来在动物焦虑模型的研究中， CRF 肽家族及其受体取得了令人兴奋的结果。本研究采用经典动物焦虑模型 —— 十字架空装置（ elevated plus maze ），探讨 CRF 肽家族的新成员即 CRF2 型受体的内源性配体 ——Ucn3 对焦虑样行为的效应，以及 Ucn3 对 5- 羟色胺神经元集中区中缝背核、及其 5- 羟色胺神经元投射区 —— 杏仁核、海马的 5-HT 的表达情况，以进一步探讨 Ucn3 可能的作用机制， CRF 肽家族及其受体与 5- 羟色胺能神经元的关系。
方法：
成年 Wistar 雄性大鼠 36 只，体重 190 -210g ，自由进食、饮水，控制干扰声音和光线，控制室温于 18 -20 ℃ ，适应环境 1 周。将大鼠腹腔注射 20% 水合氯醛（ 0.2ml/ 100g ）麻醉后 , 固定于立体定位仪上 , 头顶剃毛 , 消毒。切开颅顶皮肤筋膜，充分暴露前囟点，并用蓝墨水标记。根据 Paxinos&Wastson 大鼠脑图谱确定侧脑室位置（前囟点后 1.0mm 、矢状缝右侧 1.5mm ，硬脑膜下 4.0mm ）。在此位置上方颅骨相应部位，用牙科钻钻孔（孔径约 1.5mm ） , 将套管 ( 直径约 0.9mm ) 置于脑室内 , 干燥术野 , 用牙科水泥将套管固定于颅骨上。术后大鼠单笼饲养，恢复 7 天，每日抚摸抓大鼠 5 分钟，使其适应实验人员的操作。实验当日将大鼠随机分为三组，实验组 12 只，对照组 12 只，空白组 12 只。实验组侧脑室注射 10ug Ucn3 ，对照组侧脑室注射 5ul 生理盐水。 10 分钟后，两组采用十字架空装置评估焦虑样行为的改变。在行为学评定后 2 小时，灌流取脑。空白组侧脑室注射 5ul 生理盐水， 2.5 小时后处死，灌流取脑。冰冻切片、免疫组化常规染色。
结果：
(1). 行为学的改变：侧脑室给予 Ucn 3 后十分钟，能够显著增加大鼠对开放臂的探究时间（ t=2.45,P<0.05 ），延长在开放臂的停留时间百分比（ t=2.75,P<0.05 ），对封闭闭区停留时间的影响未达到统计学显著差异 (t=1.84,P>0.05) 。在开放区的停留时间、停留时间百分比与大鼠的抗焦虑样行为的产生有关。 (2) 中缝背核、杏仁核、海马神经元中 5-HT 的表达： Ucn3 组 DR 区 5-HT 阳性细胞平均光密度值（ OD ）比空白组显著增加（ F=25.42,P<0.01 ）； Ucn3 组 ce 区 5-HT 阳性细胞 OD 值比对照组显著增加（ F=24.29,P<0.01 ） , Ucn3 组比空白组显著增加（ F=24.29,P<0.01 ）；在海马的 CA3 区， Ucn3 组 5-HT 阳性细胞 OD 值比空白组显著增加（ F=6.26 ， P<0.05 ）。空白组与对照组均无任何显著差异（ P>0.05 ）。
结论：
本研究提示 Ucn3 作为 CRF2 型受体的内源性配体之一，能够增加抗焦虑样行为的产生，与 CRF 作用结果相反。同时提示 5-HT 的表达参与了调节应激的行为反应，可能使抗焦虑样行为增多。 Ucn3 增加了 5- 羟色胺神经元集中区中缝背核、及其 5- 羟色胺神经元投射区 —— 杏仁核、海马的 5-HT 表达，这提示 Ucn3 的抗焦虑样作用可能和 5-HT 表达增加有关， CRF 肽家族及其受体能影响 5- 羟色胺能神经元的投射。
【关键词】 焦虑样行为 CRF Ucn3 5-HT
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